替格瑞洛的体外代谢及其与他汀类药物的相互作用研究

摘要

目的考察替格瑞洛在大鼠肝微粒体的酶动力学及其与CYP3A的底物药物辛伐他汀、洛伐他汀及阿托伐他汀的相互作用,以期为临床上替格瑞洛与他汀类药物的合理使用提供科学依据。方法将替格瑞洛与大鼠肝微粒体进行体外共孵育,孵育一定时间后用含有内标(地西泮,10 ng·mL^-1)的甲醇终止反应,并沉淀蛋白,14 000 r·min^-1离心10 min后取上清液进行分析,采用LC-MS/MS测定微粒体酶孵育体系中活性代谢产物AR-C124910XX的浓度,使用Prism 5软件计算主要的酶促动力学参数Km,Vmax与CLint。在得到Km后,反应体系中底物替格瑞洛的浓度选择为1/3Km^3Km内的3个浓度,辛伐他汀、洛伐他汀及阿托伐他汀的浓度范围为1~100μmol·L^-1,通过体外大鼠肝微粒体代谢实验研究其与替格瑞洛代谢性相互作用。使用SigmaPlot 12.3软件酶动力学模块,根据Dixon公式计算各他汀对替格瑞洛代谢的可逆性抑制常数Ki,并根据标准差值选择最符合的模型。结果替格瑞洛在大鼠肝微粒体的代谢符合米氏反应动力学,其转化生成AR-C124910XX的Km值为32.2μmol·L^-1,Vmax为149.0 pmol·min^-1·mg(pro)^-1。表观清除率CLint为4.63 nL·min^-1·mg(protein)^-1;辛伐他汀显著抑制替格瑞洛活性代谢产物的生成,其抑制符合混合抑制模型。抑制常数Ki为0.58μmol·L^-1,α值为7.5,β值为0.56。洛伐他汀及阿托伐他汀对替格瑞洛代谢呈现出中等强度的抑制作用,其抑制亦符合混合抑制模型,抑制常数Ki分别为2.9和7.5μmol·L^-1,α值分别为3和1.7,β值为0.34和0.29。结论替格瑞洛在大鼠肝微粒体的代谢符合米氏反应酶动力学;辛伐他汀对替格瑞洛有显著程度的代谢性抑制作用,洛伐他汀和阿托伐他汀对替格瑞洛有中等程度的抑制作用,临床上替格瑞洛与他汀类药物合用时可能需要考虑其与辛伐他汀的相互作用。