从Notch和TLR4/NF-κB信号通路研究6-姜烯酚治疗溃疡性结肠炎的作用机制

摘要

目的从与免疫炎症相关的TLR4/NF-κB信号通路和与黏膜修复相关的Notch信号通路探讨干姜有效成分6-姜烯酚治疗溃疡性结肠炎的作用和机制。方法40只昆明小鼠随机分为正常组,模型组,柳氮磺吡啶组,6-姜烯酚组,每组10只,除正常组外其余小鼠采用2%葡聚糖硫酸钠肠炎(DSS)口服诱导溃疡性结肠炎模型。柳氮磺吡啶组和6-姜烯酚组分别给予柳氮磺吡啶、6-姜烯酚100 mg·kg-1混悬液灌胃,其余各组给予等量生理盐水,给药20 d后取血清和结肠组织。免疫荧光法检测结肠上皮组织Hes-1、Math-1、MUC2和olfm4蛋白的表达,RT-PCR、Western blot法检测结肠上皮组织notch-1、Hes-1、Math-1、TLR4、NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果与模型组比较,柳氮磺吡啶组、6-姜烯酚组小鼠结肠上皮组织Notch-1、Hes-1、TLR4、NF-κBp65蛋白表达和mRNA相对表达量显著降低,Math-1蛋白表达和mRNA相对表达量显著升高,血清TNF-α和IL-1β含量显著降低;6-姜烯酚组小鼠结肠上皮组织olfm4蛋白表达显著降低,MUC2蛋白表达显著增强,柳氮磺吡啶组小鼠结肠上皮组织olfm4和MUC2蛋白表达无明显变化;与柳氮磺吡啶组比较,6-姜烯酚组小鼠结肠上皮组织Notch-1、Hes-1蛋白表达和mRNA相对表达量显著降低,Math-1蛋白表达和mRNA相对表达量显著升高,olfm4蛋白表达显著降低,MUC2蛋白表达显著增强,但TLR4、NF-κBp65蛋白表达和mRNA相对表达量以及血清TNF-α、IL-1β含量无明显变化。结论6-姜烯酚既能抑制肠道免疫炎症,又能促进受损结肠黏膜的修复,治疗溃疡性结肠炎,其机制与抑制Notch和TLR4/NF-κB信号通路的过度活化相关。