黄芪-灯盏细辛成分联用对慢性脑缺血小鼠神经损伤的保护机制研究

摘要

目的 探究黄芪甲苷、绿原酸、野黄芩苷联用对慢性脑缺血小鼠的保护作用及机制。方法 健康KM小鼠60只,随机分为假手术组、模型组、两组成分联用组(两组的黄芪甲苷、绿原酸、野黄芩苷给药剂量分别为14、 42、28 mg·kg^(-1)和28、 84、56 mg·kg^(-1)),阳性药组,每组12只。除假手术组外,其余各组小鼠采用右侧颈总动脉结扎法(rUCCAO)建立慢性脑缺血小鼠模型。造模前各组小鼠经灌胃预防给药10 d,造模后再连续给药30 d,每天1次。采用旷场实验评价各组小鼠自发能力及探索行为;激光散斑检测脑血流变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织核红细胞2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)、剪切化半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)Nrf2、HO-1、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3等蛋白表达水平。结果 成分联用各剂量组均可显著促进脑缺血小鼠脑血流恢复,改善自发活动能力(P<0.05);明显提高血清中SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量(P<0.01);上调Nrf2、HO-1蛋白表达,提高p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、Bcl-2/Bax蛋白比值,降低Cleaved caspase-3蛋白水平(P<0.05 or P<0.01)。结论 黄芪甲苷、绿原酸、野黄芩苷联用可能通过上调Nrf2/HO-1、PI3K/AKT信号通路,抵抗氧化应激损伤与神经细胞凋亡,对慢性脑缺血小鼠产生保护作用。