蚓激酶对活化血小板Ca(2＋)i、JNK1和P-选择素表达的影响

摘要

目的研究蚓激酶(lumbrokinase,LK)对大鼠血小板内钙离子浓度(intracellular calcium concentration,[Ca2+]i)、c-Jun氨基末端激酶-1(c-Jun N-terminal kinase-1,JNK1)以及人血小板P-选择素(P-selection,Ps)表达水平的影响,阐明LK抗血小板活化的部分机制。方法用荧光分光光度计测定LK对大鼠血小板活化过程中胞浆[Ca2+]i的影响;免疫蛋白印记方法检测LK对大鼠血小板JNK1磷酸化水平的影响;流式细胞仪测定LK对人血小板活化过程中Ps表达水平的影响。结果 LK高剂量组(100 mg·L-1)和中剂量组(50mg·L-1)大鼠血小板[Ca2+]i分别为(425.49±37.4)nmol·L-1和(509.65±35.67)nmol·L-1,与诱导组血小板[Ca2+]i(555.59±39.71)nmol·L-1相比显著降低(P<0.01,P<0.05);LK高剂量组(100 mg·L-1)和中剂量组(50 mg.L-1)大鼠血小板JNK1磷酸化水平分别为(0.60±0.069)和(0.79±0.048),与诱导组血小板JNK1磷酸化水平(0.87±0.037)相比显著降低(P<0.01,P<0.05);LK高剂量组(100mg.L-1)和中剂量组(50mg·L-1)人血小板Ps水平为(42.99±2.69)和(44.72±2.09),与诱导组(49.99±3.81)相比显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论体外实验表明LK能够抑制大鼠血小板胞浆[Ca2+]i升高和JNK1的磷酸化,同时也能抑制人血小板Ps的表达水平的升高,从而起到抗血小板活化作用。