诱导型一氧化氮合酶基因在V79成纤维细胞中的转染及鉴定

摘要

目的观察诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因转染V79成纤维细胞后，iNOS基因的表达和分泌一氧化氮（NO）的情况。方法采用分子生物学技术，将真核表达载体pcDNA3-iNOS转入V79细胞中，经G418筛选，克隆扩增，通过RT—PCR和免疫荧光法进行鉴定，同时测定转染组和空质粒组细胞上清液NO的含量。结果pcDNA3-iNOS转染后的V79成纤维细胞中有iNOSmRNA的转录和iNOS蛋白的表达。iNOS转染组NO含量（237．67±27．28）与空质粒组（84．22±12．67）相比有显著性差异（P〈0．001）。结论iNOS基因可以成功地转入V79成纤维细胞中，并可以稳定表达和具有分泌NO的功能。