泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养的相互作用研究

摘要

目的 探究泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养后,原头节的活性、成囊以及肝癌细胞的增殖与凋亡情况.方法 构建泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养模型,以存在肝癌细胞共培养的泡球蚴原头节为实验组,无肝癌细胞共培养的泡球蚴原头节为对照组,光镜下观察泡状棘球蚴原头节存活数量、活性以及成囊情况;以存在原头节共培养的肝癌细胞为实验组,无原头节共培养的肝癌细胞为对照组,利用CCK-8 检测肝癌细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测肝癌细胞凋亡情况,Real-Time PCR 检测凋亡相关分子 caspase3、caspase9、Bax、Bcl-2、P21、P53的 mRNA 表达情况,Western-blot 方法检测caspase3、caspase9、Bax、Bcl-2的蛋白表达情况.结果 共培养后,实验组泡球蚴原头节的存活率[(91.42±2.47)％]显著高于无饲养细胞组[(73.10±4.68)％,t =-7.738,P＜0.05],且活性较高;利用肝癌细胞作为饲养细胞时原头节的成囊率[(66.72±2.02)％]显著高于无饲养细胞组的成囊率[(30.21±2.25)％,t = 11.228,P＜0.01];CCK-8结果显示随着原头节的比例增高,肝癌细胞的增殖能力逐渐增强,且显著高于对照组;Real-Time PCR 显示实验组的Bc l-2 表达量显著高于对照组,而cas pase 3、cas pase 9、Bax、P21、P 53 的表达量低于对照组.Western blot 结果与实时荧光定量PCR 结果相一致,显示实验组Bcl-2表达量显著高于对照组,而caspase3、caspase9、Bax 的表达量低于对照组.结论 泡球蚴原头节与肝癌细胞共培养时肝癌细胞可以促进原头节的存活,且会使原头节保持高活性状态,促进其成囊;反之原头节也会促进肝癌细胞的增殖,抑制肝癌细胞的凋亡.