鼠疫耶尔森氏菌LcrV基因的克隆与表达研究

摘要

目的研究鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)保护性抗原V蛋白的生物学活性,进而研究Y.pestis的致病机理.方法采用PCR 方法,从Y.pestis菌种中扩增出LcrV基因片段,进行鉴定后,然后将该片段克隆于原核表达载体pBV2 20,构建成重组质粒pBV/LcrV,进行温控诱导表达.结果 (1)获得长约9 80bp的PCR片段,序列分析结果与已知LcrV序列相同.(2)SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量38×103处有表达条带.(3)经薄层扫描分析,目的蛋白条带占全菌蛋白的38.4% .(4)表达后菌体超声破碎后,目的蛋白主要存在于上清中.结论获得了LcrV基因,并在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物主要以可溶状态存在.