细粒棘球绦虫EG95基因的克隆和序列分析

摘要

目的获得细粒棘球蚴EG95基因序列资料,进行序列分析,为研究包虫病疫苗候选抗原基因奠定基础.方法 从包囊内获取细粒棘球蚴原头蚴(protoscoleces),提取RNA和DNA,用特异引物分别以基因组DNA和cDNA为模板扩增EG95基因;并将其克隆到T载体后进行序列测定和分析.结果以基因组为模板获得一个基因,长度为1253bp,以cDNA为模板获得两个基因,长度分别为1121bp和833bp;同源性比较结果表明:来自新疆羊源EG95基因序列和澳大利亚羊源EG95-2基因同源性为98%,有13个碱基变异;从cDNA获得的EG95基因(EG95-like)和DNA来源的EG95相同,只是EG95序列的一部分;从cDNA获得的另一个EG95基因(mEG95)和澳大利亚源EG95-2同源性为99%,有2个碱基不同.分析表明EG95是一个基因家族,可能是虫体发育到六沟蚴阶段特定表达的基因.结论 EG95是一个基因家族,进一步研究该基因家族的结构和功能对包虫病的免疫预防具有重要意义.