弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒的构建与表达

林绮萍; 吴少庭; 翁亚彪; 秦莉; 黄达娜; 袁仕善

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弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒的构建与表达

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@@ 构建弓形虫致密颗粒蛋白GRA4的真核表达质粒,并研究其在HEK-293细胞中的表达情况.采用PCR方法自弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-GRA4重组质粒;利用脂质体介导的转染技术,将其导入HEK-293细胞,RT-PCR法检测mRNA表达情况,Western-blot法鉴定表达产物.从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出GRA4基因片段,成功构建重组表达质粒pVAC-GRA4;转染GRA4的HEK-293细胞,RT-PCR检测可见一条约987bp的目的条带,表达产物经Western-blot鉴定,其分子量约为41kD,能被pET-GRA4重组蛋白免疫血清所识别.构建的真核表达质粒pVAC-GRA4能在HEK-293细胞中表达,为弓形虫疫苗的进一步研究打下基础.

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来源
《中国人兽共患病学报》|2004年第z1期|89-90|共2页
作者
林绮萍; 吴少庭; 翁亚彪; 秦莉; 黄达娜; 袁仕善;
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作者单位

华南农业大学兽医学院,广州,510642;

圳市疾病预防控制中心,广东,深圳,518020;

华南农业大学兽医学院,广州,510642;

华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,武汉,430030;

圳市疾病预防控制中心,广东,深圳,518020;

圳市疾病预防控制中心,广东,深圳,518020;

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正文语种 chi
中图分类基础医学;
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