嗜肺军团菌mip基因的克隆与表达

摘要

目的扩增嗜肺军团菌mip基因,导入载体pUC18,构建重组质粒pLpmip,并在原核系统中表达.方法采用聚合酶链式反应(PCR)从嗜肺军团菌扩增得到巨噬细胞感染增强蛋白基因(mip基因),导入载体pUC18,构建重组质粒pLpmip并转化大肠杆菌JM109,并用限制性酶切分析、聚合酶链式反应、序列分析、硫酸十二烷酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western印迹进行鉴定.结果扩增出828bp的mip基因;构建重组质粒pLpmip;表达出24kD的抗原区带.结论成功扩增828bp的嗜肺军团菌mip基因,构建重组质粒pLpmip,并在原核系统中表达出24KD的抗原区带.