产肠毒素性大肠杆菌致病因子F41、K99菌毛基因的克隆与表达

摘要

目的 为了分析原核表达的ETEC F41和K99菌毛亚单位的抗原性和作为基因工程亚单位疫苗的可能性.方法 针对黏附素F41和K99的编码序列,设计两对特异性引物,扩增F41和K99菌毛蛋白的编码基因,经序列测定后,克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化E.coli BL21(DE3),筛选到可以表达F41和K99菌毛亚单位的菌株.经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot试验分析原核表达的F41和K99重组蛋白的抗原性.结果 表达的F41和K99菌毛亚单位蛋白可以与抗F41和K99菌毛蛋白的单因子血清反应.结论 原核表达的F41和K99重组蛋白具有良好的抗原性.