利用毕赤酵母菌SMD1168表达SSA重组抗原

摘要

目的 利用电穿孔法将pPIC9k-SSA重组质粒导入毕赤酵母菌SMD1168真核表达系统进行诱导表达,获得SSA重组抗原.方法 以人白血病淋巴细胞HL-60株为模板扩增SSA基因,将其转入pPIC9k质粒构建pPIC9k-SSA重组质粒,采用电穿孔法将其导入毕赤酵母菌SMD1168真核表达系统进行诱导表达,获取目的 蛋白.结果 成功构建pPIC9k-SSA重组质粒并导入毕赤酵母菌SMD1168真核表达系统中,获得稳定整合目的 基因的菌株;重组菌株经诱导表达出产物相对分子量约为50 kDa的SSA蛋白,具有抗原性可与SSA抗体特异性结合.结论 本实验室通过分子克隆技术,从毕赤酵母菌SMD1168真核表达系统中获得了人SSA抗原,为今后建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)法检测抗SSA抗体奠定基础.