尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原诊断效果及组分分析

摘要

目的 分析尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原的蛋白组成、免疫特性及在舌形虫病诊断中的诊断效果.方法 自感染尖吻蝮蛇舌形虫虫卵4个月的小鼠体内取尖吻蝮蛇舌形虫若虫,匀浆,用盐析法制备抗原.以此粗制抗原包被微量反应板,用间接ELISA方法检测尖吻蝮蛇舌形虫病人、感染小鼠及其它寄生虫病人血清中的特异性IgG抗体.用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western Blot)技术分析该粗制抗原的有效抗原蛋白组分.结果 ELISA方法检测尖吻蝮蛇舌形虫病人血清5份,正常人血清17份,感染小鼠、血吸虫病、肺吸虫病、肝吸虫病、囊虫病、旋毛虫病病人血清各20份,蛔虫病、钩虫病、鞭虫病病人血清各10份,发现舌形虫病人和感染小鼠血清均为阳性,其它寄生虫病人血清均为阴性.经SDS-PAGE和Western Blot分析,尖吻蝮蛇舌形虫成虫粗抗原可见5条主带和14条次带(Mr 16-200 kDa);若虫粗抗原可见9条主带和13条次带(Mr 16-150 kDa),其中有16条特异性条带可被感染小鼠血清识别,5条特异性条带可被舌形虫病人血清识别,与肺吸虫病、鞭虫病病人血清在约Mr 34 kDa附近处出现较微弱的交叉反应带,同其它寄生虫病人血清未出现交叉反应带.结论 尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原同其它寄生虫病的交叉反应较小,可用于尖吻蝮蛇舌形虫病的血清学检测,而其有效的诊断抗原成分需经纯化后再行进一步的分析.