以减毒沙门氏菌为载体的抗贾第虫肠溶疫苗制备及免疫效果检测

摘要

目的 以携带α1-giardin DNA的减毒沙门菌为对象,探讨肠溶制剂的制备、免疫剂量和免疫效果.方法 携带有贾第虫α1-giardin基因的重组减毒沙门菌经培养扩增冻干后,对各种辅料,包括微分硅胶、分散剂、润滑剂、崩解剂、包衣液等成分与减毒沙门菌的相容性,及包衣条件进行检测.采用最佳配方制备肠溶片剂,用于动物免疫试验.初始免疫后第25 d后,分别检测血清和小肠灌洗液中抗rα1-giardin特异性IgG和SIgA的水平;并用106个贾第虫滋养体灌胃,每天检测各组小鼠粪便中的滋养体和(或)包囊的排出率.结果 肠溶片剂的处方中微分硅胶和分散剂的用量分别为菌粉用量的10 ％和2倍;润滑剂和崩解剂的用量分别占处方量的0.8％和2％;包衣液的浓度为20％,包衣增重为处方量的6％.每个包衣片活菌含量在4×10 6以上.动物试验表明,以SL7207/pVAX1 rα1-giardin肠溶片剂免疫鼠小肠灌洗液中特异性抗rα1-giardin SIgA的水平明显高于对照组,并在攻虫试验具有46.7％的减虫率,明显高于rd1-giardin肌注免疫组(23％)(P＜0.01).结论 本研究为多种以减毒沙门菌为载体的DNA疫苗的肠溶制剂的研究提供了实验依据,如规模化生产,该处方尚需进一步完善.