应用反转录聚合酶链反应检测鸡传染性支气管炎病毒核酸的研究

摘要

根据国外报道的鸡传染性支气管炎病（ＩＢＶ）Ｇｒａｙ株的纤突蛋白（Ｓ１）核苷酸序列，自行设计合成了Ｓ１蛋白主要抗原决定簇基因两侧的１对引物，跨幅为１．０ｋｂ。用该引物对内蒙古、天津、山东等地分离的３株ＩＢＶ进行ＲＮＡ提取，反转录后ＰＣＲ，经琼脂糖凝胶电泳结果表明，３株毒株均获得了与预期一致的ＰＣＲ产物；此外，ＩＢＶ ＰＣＲ灵敏度的测定结果表明，ＰＣＲ方法可检出１０ｐｇ的模板，ＰＣＲ酶切结果为，Ｈａｅ