猪源产肠毒素大肠杆菌三重PCR检测方法的建立及应用

摘要

为建立一种简单、快速、灵敏、准确的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)检测方法,根据产肠毒素大肠杆菌菌毛(K88)和毒素(STa和LT)基因分别设计合成了1对引物,对K88、STa和LT基因扩增条件进行优化,建立了检测K88、STa和LT的三重PCR方法.该方法对K88、STa和LT基因的扩增产物分别为499 bp,190bp和373 bp;此外,该方法具有良好的灵敏性和特异性.本实验建立的三重PCR方法为致幼畜腹泻ETEC的检测提供了快速准确方法.用所建立的三重PCR方法对实验室从临床腹泻样品中分离的120株大肠杆菌进行检测,结果9株为K88/LT/STa阳性,14株为K88/LT阳性,21株K88/STa阳性,13株LT/STa阳性,8株K88阳性,2株LT阳性,12株STa阳性.