柔嫩艾美耳球虫裂殖子对侵入细胞凋亡抑制通路的研究

摘要

为了研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenlla)裂殖子入侵宿主细胞后对凋亡诱导的抑制通路,将纯化的裂殖子与牛肾传代细胞(MDBK细胞)共培养1.5 h.用含6％乙醇的完全培养基诱导细胞凋亡2.5 h,通过流式细胞术检测细胞凋亡率.采用标准试剂盒测定CytoC,Caspase8,Caspase9,Caspase3的活性.流式细胞术结果显示,入侵裂殖子的细胞在诱导凋亡后其凋亡率为4.57％,而未感染的细胞其凋亡率达到23.69％,二者差异显著(P＜0.05),诱导凋亡的MDBK细胞早期凋亡率为19.50％,晚期凋亡率为4.19％,而感染裂殖子后诱导凋亡的MDBK细胞其早期凋亡率为3.53％,晚期凋亡率为1.04％,差异显著(P＜0.05).结果表明,裂殖子的入侵不但可以抑制细胞凋亡,还可以延缓细胞进入早期凋亡的时间.试剂盒结果表明,裂殖子使Cyto C,Caspase8,Caspase9的活性下降,而Caspase3没有变化.根据上述结果初步判断,E.tenlla裂殖子抑制MDBK细胞的凋亡是通过线粒体通路.