猪δ冠状病毒胶体金试纸条检测方法的建立

摘要

为建立一种方便、快捷、实用的检测猪δ 冠状病毒(PDCoV)方法,原核表达PDCoV N蛋白,以纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤细胞技术研制2株分泌PDCoV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为E8、A10.2株杂交瘤细胞分泌单克隆抗体敏感性及特异性良好,E8亚类为IgG2a,A10亚类为IgG1.以E8作为金标抗体、A10作为检测抗体、兔抗鼠作为质控线抗体制备PDCoV胶体金检测试纸条,检测PDCoV敏感性为100 TCID50,检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒、PDCoV阴性对照均为阴性.本研究建立的胶体金试纸条检测方法敏感性及特异性良好,为PDCoV检测及流行病学调查奠定基础.