猪场爆发猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及实验室检测

摘要

在对某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断、病理诊断、抗体快速金标检测、回归动物实验和细胞病变观察的基础上,参考 GenBank上PRRSV LV和VR-2332毒株核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,以提取来自贵州某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料(包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织)的总RNA为模版,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,经94 ℃预变性2 min;94 ℃变性45 s,60 ℃退火1 min,72 ℃延伸1 min进行35个循环;72 ℃再延伸10 min进行扩增.扩增产物经回收纯化后,应用pMD18-T 载体进行克隆后测序.测序结果表明,所扩增DNA片段大小为716 bp,该核苷酸序列与湖南发现的PRRSV序列同源性为100%.本实验结果说明临床诊断及实验检测方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是可靠的,可为猪繁殖与呼吸综合征诊断提供参考依据.