一株牛病毒性腹泻/黏膜病毒株的分离与鉴定

摘要

从云南某牛场疑似BVDV感染的病料通过接种MDBK细胞分离到1株BVDV,为了解分离毒株的特性,进行了病原学和分子生物学研究.该分离毒株连传15代均不产生CPE,为NCP型BVDV.通过电镜检测可观察到直径为40～60 nm病毒粒子.该分离病毒能被牛病毒性腹泻标准阳性血清中和,且能被BVDV IFA荧光抗体识别;采用BVDV 5'-UTR基因特异性引物,经RT-PCR可扩增出288 bp特异性片段.将该片段测序后与GenBank已发表的30株BVDV 5'-UTR序列进行同源性比较,同源性为68.7％～89.2％.与我国分离的BJ1202株(登陆号:KF925514.1)和Y2株(登陆号:KY964311.1)同源关系最近,均为89.2％.与2014年以来我国分离的BVDV毒株亲缘关系在88％左右.5'-UTR遗传进化分析证实该分离毒株为BVDV-1型.动物回归试验显示,该分离毒株可引起出现体温升高、腹泻、粘膜病等典型的BVD/MD症状.结果表明,分离的毒株为BVDV,命名为BVDV/W株.