真核始动因子4E反义寡核苷酸对人膀胱癌BIU-87细胞中eIF4E和肝素酶表达的影响

摘要

目的探讨真核始动因子4E（eIF4E）反义寡核苷酸（ASODN）对人膀胱癌BIU-87细胞株中eIF4E及肝素酶（HPA）蛋白、mRNA表达的影响。方法采用脂质体介导方法分别将2.5、5.0及7.5μg/ml eIF4E ASODN转染膀胱癌BIU-87细胞,并设立细胞对照组（不转染）、空白对照组（转染空脂质体）及无关对照组（转染无关对照ASODN）,分别转染24、48及72 h,采用原位杂交、免疫细胞化学方法分别检测各组BIU-87细胞中eIF4E及HPA蛋白、mRNA表达。结果 eIF4E ASODN各转染组细胞中eIF4E蛋白及mRNA表达量均较对照组降低（蛋白:2.5μg/ml组分别为3.55±0.52、3.52±0.51、3.22±0.44;5.0μg/ml组分别为3.43±0.47、3.41±0.46、3.19±0.41;7.5μg/ml组分别为2.36±0.39、2.33±0.37、2.05±0.30。mRNA:2.5μg/ml组分别为3.19±0.41、3.13±0.39、2.90±0.38;5.0μg/ml组分别为3.07±0.39、2.94±0.38、2.27±0.37;7.5μg/ml组分别为2.22±0.37、2.06±0.30、1.95±0.29）,与细胞对照组、空白对照组和无关对照组相应时间段、相应浓度组两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,且具有时间和浓度依赖性。eIF4E ASODN各转染组细胞中HPA蛋白及mRNA表达量均较对照组降低（蛋白:2.5μg/ml组分别为4.44±0.55、4.40±0.54、3.99±0.52;5.0μg/ml组分别为4.41±0.55、4.21±0.53、3.77±0.50;7.5μg/ml组分别为4.02±0.52、3.98±0.52、2.32±0.37。mRNA:2.5μg/ml组分别为4.12±0.51、3.75±0.50、3.63±0.45;5.0μg/ml组分别为4.00±0.51、3.71±0.50、3.54±0.44;7.5μg/ml组分别为3.87±0.52、3.61±0.49、2.08±0.30）,与细胞对照组、空白对照组和无关对照组两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,且具有时间和浓度依赖性。eIF4E ASODN对HPA蛋白、mRNA表达的抑制效应和对eIF4E蛋白、mRNA表达的抑制效应呈正相关关系（HPA蛋白r=9.23,mRNAr=9.59,P值均＜0.01）。结论 eIF4E ASODN可下调膀胱癌BIU-87细胞中eIF4E、HPA蛋白及mRNA的表达,抑制肿瘤细胞的生长、浸润及转移。