异质性耐药对结核分枝杆菌表型和基因型耐药检测结果的影响

摘要

目的研究异质性耐药对MTB基因型耐药检测结果的影响。方法选择上海市疾病预防控制中心在2009年收集的80株氧氟沙星临床耐药菌株, 利用基因测序检测菌株在gyrA和gyrB耐药决定区的基因突变情况, 再用分子克隆和荧光定量PCR探针熔解曲线法, 分析经基因测序未检测到耐药突变的菌株中是否存在异质性耐药现象。结果基因测序报告显示, 80株氧氟沙星耐药菌株中有15株未发现已知gyrA或gyrB耐药决定区的基因突变。测序图谱及分子克隆和探针熔解曲线法分析结果表明, 其中14株菌株含有已知gyrA耐药突变, 即存在异质性耐药现象。纳入异质性耐药的菌株后, 基因型与表型耐药检测的符合率从81.3%（65/80）提高到98.8%（79/80）。结论异质性耐药是导致表型和基因型耐药检测结果不符的重要原因。为排除异质性耐药对耐药基因检测的影响, 提高基因型与表型耐药检测结果的一致性, 需要开发应用更敏感的基因型耐药检测技术, 以提高耐药结核病快速检测水平。