番茄LE-ACC2合酶基因5'端前导序列分离方法的研究

摘要

通过PC/Gene软件对Rottmann等人发表的番茄LE-ACC2合酶的5'端2.0Kb的前导序列作分析,设计了4对特异引物;以番茄果实、叶片的总DNA为模板,采用特异PCR扩增技术获得了2.0,1.87,1.58,1.28Kb4个特异片段,用T-Vector技术构建了1个克隆(2.0Kb)、3个亚克隆(1.87,1.58,1.28Kb),对4个克隆产物进行了DNA序列测定,借助PC/Gene软件对所获得的各克隆序列进行综合处理与分析,获得了番茄LE-ACC25'端前导序列的同源率为99.9%,但第-979位的C和第-1076位的T分别为T和C所替代.对利用PCR技术分离大片段DNA的各环节作了较详细的研究.