高温胁迫下瓜实蝇的内参基因筛选

摘要

基于实时荧光定量PCR技术,测定瓜实蝇雌成虫GAPDH、SD、β-TUB、ACT和RPL13共5个备选内参基因分别在25(CK)、37、45℃下处理1h的mRNA水平表达情况,并借助Bestkeeper、Normfinder和GeNorm程序分析5个备选内参基因表达的稳定性.筛选得出BestKeeper:SD值排序为SD(0.06)=GA PDH(0.06) ＜RPL13(0.11)＜β-TUB(0.15)＜ACT(0.23);Normfinder:稳定值排序为SD (0.004) =RPL13 (0.004) ＜GA PDH (0.005)印-TUB(0.006)＜ACT(0.010);GeNorm:M值排序为SD (0.011) =RPL13 (0.011) =GA PDH (0.011) ＜β-TUB (0.012) ＜A CT(0.016).综合分析结果可选定SD为最稳定的内参基因,RPL13和GA PDH次之.该结果可为深度开展高温胁迫下瓜实蝇其它基因的表达情况研究提供参照.