石斛多糖保护中波紫外线损伤成纤维细胞的作用机制

摘要

背景:中波紫外线导致活性氧升高,是光损伤和光老化最重要的物理因素.石斛所含有的石斛多糖可提高抗氧化酶活性、清除自由基、抑制脂质过氧化的活性,对稳定生物膜及延缓衰老有一定的作用.目的:探讨石斛多糖对中波紫外线诱导体外培养人成纤维细胞光损伤的保护作用及可能机制.方法:体外培养人成纤维细胞,将其随机分为4组:对照组细胞正常培养;模型组细胞进行紫外线一次性照射,照射剂量为20 mJ/cm2;石斛组培养基中加入质量浓度30 mg/L石斛多糖干扰培养;实验组细胞用照射剂量为20 mJ/cm2紫外线照射后,加入30 mg/L石斛多糖干扰培养.各组细胞分别处理后培养48 h.用qRT-PCR、Western blot、免疫组化检测Nrf2、超氧化物歧化酶基因和蛋白表达,用荧光检测细胞活性氧水平,比色法测定丙二醛含量.结果 与结论:①与对照组比较,模型组、石斛组、实验组Nrf2和超氧化物歧化酶的mRNA及蛋白表达明显上调(均P＜0.05),实验组显著高于模型组和石斛组(P＜0.05);②模型组活性氧明显升高(P＜0.05),石斛组活性氧降低(P＜0.05),实验组活性氧明显低于模型组(P＜0.05);③与对照组比较,模型组、实验组丙二醛明显升高(P＜0.05),石斛组明显降低(P＜0.05),实验组明显低于模型组(P＜0.05);④结果说明,石斛多糖对中波紫外线导致体外培养人成纤维细胞光老化和光损伤具有一定的保护作用,其主要作用机制是通过Keap1-Nrf2-ARE信号通路调控超氧化物歧化酶的产生,清除活性氧,减少中波紫外线对细胞的损伤.