GOLM1基因敲除对单侧输尿管梗阻小鼠肾纤维化的影响

摘要

背景:高尔基体膜蛋白1在人体组织中广泛存在,它的异常表达与癌症、病毒感染等多种疾病密切相关.研究表明,高尔基体膜蛋白1可调控一些纤维化细胞因子,但关于其在肾纤维化中的作用尚不清楚.目的:研究高尔基体膜蛋白1对单侧输尿管梗阻小鼠肾纤维化的影响.方法:选取6-8周龄的高尔基体膜蛋白1敲除小鼠(KO小鼠)和C57BL/6野生型小鼠(WT小鼠)各12只,分别对小鼠左侧肾脏行单侧输尿管结扎(单侧输尿管梗阻)手术,其右侧肾脏作为对照.单侧输尿管梗阻术后4 d取小鼠肾脏,采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察肾组织病理、肾纤维化程度;流式细胞术检测肾脏巨噬细胞浸润比例;qRT-PCR检测肾组织细胞外基质成分及炎症因子mRNA表达.实验方案经上海交通大学动物实验伦理委员会批准.结果与结论:①WT-单侧输尿管梗阻组和KO-单侧输尿管梗阻组均可见明显肾损伤和肾纤维化,细胞外基质成分Ⅰ型胶原蛋白α1和纤维连接蛋白表达量显著升高,且KO-单侧输尿管梗阻组肾损伤、肾纤维化程度及细胞外基质表达量均高于WT-单侧输尿管梗阻组(P<0.05);WT-对照组和KO-对照组肾脏均未出现明显的肾损伤、肾纤维化及细胞外基质沉积;②与WT-单侧输尿管梗阻组相比,KO-单侧输尿管梗阻组的巨噬细胞浸润比例显著增多(P<0.05),其炎症因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β以及趋化因子CCL5、单核细胞趋化蛋白1 mRNA表达明显升高(P<0.05).WT-对照组和KO-对照组肾脏巨噬细胞浸润较少,炎症递质表达量低;③结果说明,高尔基体膜蛋白1在肾纤维化发展中起保护作用,其机制可能与巨噬细胞浸润、炎症递质的调控有关.