骨髓间充质干细胞外泌体调节哮喘小鼠Foxp3^＋ Treg/Th17的平衡

摘要

背景：Th1/Th2失衡是哮喘的基本的病理生理表现,但近来的研究表明哮喘还与调节T细胞（Foxp3^＋Treg）/Th17的失衡有关。许多研究表明间充质干细胞的免疫调节作用与其分泌的外泌体相关。目的：观察骨髓间充质干细胞外泌体注射对哮喘小鼠气道炎症及Foxp3^＋Treg细胞、Th17细胞及支气管肺泡灌洗液中细胞因子的影响。方法：将27只SPF级BALB/c小鼠分为3组：正常对照组、哮喘模型组、外泌体处理组。除正常对照组外,其他两组以卵白蛋白致敏和激发的方法建立哮喘动物模型,外泌体处理组在第21天激发的同时尾静脉注射外泌体。最后1次激发后24 h,检测各组小鼠脾中Foxp3^＋Treg及Th17占淋巴细胞的比例,检测Foxp3^＋Treg中CTLA-4及PD-1表达,检测CD4^＋T细胞中p27^kip1表达,支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数,肺泡灌洗液中白细胞介素4,5,13,10,17及干扰素γ表达,并进行肺组织病理观察。结果与结论：（1）小鼠脾组织中Foxp3^＋Treg占淋巴细胞比例及Foxp3^＋Treg上CTLA-4和PD-1表达：外泌体处理组高于哮喘模型组（P〈0.01）;（2）脾组织中Th17细胞占淋巴细胞的比例：哮喘模型组〉外泌体处理组〉正常对照组（P〈0.01）;（3）支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数：外泌体处理组炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞计数,单核巨噬细胞计数显著低于哮喘模型组（P〈0.01）;（4）肺组织病理变化：正常对照组气道无明显炎症细胞浸润,哮喘模型组气道炎症显著,外泌体组气道炎症明显减轻;（5）支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平检测：与哮喘模型组相比,外泌体处理组白细胞介素13和Th17相关的白细胞介素17水平降低（P〈0.05,P〈0.01）,Foxp3^＋Treg相关的白细胞介素10水平升高（P〈0.01）;（6）CD4^＋T细胞中p27^kip1的表达：外泌体处理组p27^kip1的表达高于哮喘模型组;（7）结果表明：骨髓间充质干细胞外泌体可以抑制哮喘小鼠气道炎症反应,逆转哮喘小鼠Foxp3^＋Treg/Th17失衡。