2型糖尿病大鼠肝脏骨形成蛋白9基因表达的变化及意义

摘要

目的:观察2型糖尿病大鼠肝细胞中糖、脂代谢调节因子骨形成蛋白9基因转录及表达的变化。方法:实验于2004年在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。取20只Wistar大鼠单纯随机分为模型组(n=15)与正常对照组(n=5)2组,模型组又按处死时间分为5,10,20d3个时间点,每个时间点5只。①模型组大鼠以高热量饲料喂养4周后,以30mg/kg剂量左下腹腹腔注射链脲佐菌素,继续饲以高热量饲料4周制备2型糖尿病模型,以随机血糖>11.1mmol/L作为糖尿病模型成功的标志;正常对照组则腹腔注射相同剂量的生理盐水,饲以普通饲料。②模型组于相应时间点处死,正常对照组与20d处死组同时处死,取肝组织,以反转录-聚合酶链反应及Western-blot技术对骨形成蛋白基因转录及蛋白表达水平进行了检测与分析。结果:20只大鼠全部进入结果分析。①反转录-聚合酶链反应产物的凝胶扫描分析定量结果显示模型组中5,10,20d处死大鼠肝骨形成蛋白9基因转录水平均低于正常对照组(0.767±0.004,0.445±0.012,0.426±0.007,0.909±0.006,t=22.016,45.417,68.364,P<0.05)。②Western-blot结果显示正常组提取的蛋白在Mr13000处可见一条清晰的骨形成蛋白9特异性杂交带,而在5,10,20d处死大鼠肝中骨形成蛋白9表达明显减弱或几乎未见表达。结论:2型糖尿病大鼠体内骨形成蛋白9基因转录及蛋白表达水平较正常均显著降低,这一变化可能与糖尿病的发生、发展有着紧密的联系。