造血细胞嵌合体供者诱导异种移植物的免疫耐受☆

摘要

目的:探讨脐血造血细胞嵌合体动物作为异种组织、器官移植的供者,诱导异种移植物免疫耐受的机制。方法:实验于2005-06/2006-01在解放军第一五九中心医院全军烧伤中心实验室完成。①采用人脐血单个核细胞经宫内胎鼠移植加新生鼠肝内注射的方法制作人脐血造血细胞嵌合体动物模型,非嵌合体对照以同法注入等量磷酸盐缓冲液。②4周后利用免疫组织化学和流式细胞三色标记检测嵌合体大鼠体内人源性细胞和补体调节蛋白,并对hCD45/SSC设门时不同区域内hCD55和hCD59阳性细胞的百分率进行分析。③用补体依赖性淋巴细胞毒性反应评估嵌合体鼠异种移植免疫适应性,与非嵌合体鼠进行比较;并对嵌合体鼠补体依赖性淋巴细胞毒性反应和外周血补体调节蛋白地相关关系进行分析。结果:①随机选择嵌合体大鼠14只,非嵌合体大鼠8只进行研究。②嵌合体鼠骨髓、脾脏和心脏中有人源性β2微球蛋白阳性细胞和hCD55,hCD59抗原存在,外周血中hCD45+细胞的比率为(6.69±4.51)%。选择hCD45/SSC设门时,hCD45+细胞区域中hCD55和hCD59阳性细胞占门内细胞数的(53.69±18.23)%和(31.8±27.5)%,占全细胞总数的(2.0±1.32)%和(0.74±0.59)%,与全细胞区域内hCD55和hCD59阳性细胞百分率犤(4.11±2.83)%和(2.82±1.38)%犦相比,差异具有显著性意义(t=-2.7～-3.7,P<0.05)。③嵌合体组补体依赖性淋巴细胞毒性反应显著低于非嵌合体组犤(20.85±15.03)%,(60.70±21.08)%,t=-3.924,P<0.01犦。④嵌合体大鼠的淋巴细胞毒试验结果与外周血hCD55+细胞百分率呈负相关(r2=0.637,P<0.05)。结论:人脐血造血细胞嵌合体大鼠的骨髓、外周血、脾脏和心脏有人源性细胞分布,嵌合体内异种补体调节蛋白的存在,可能是造血细胞嵌合体供者异种移植物免疫耐受的基础。