大鼠少突胶质前体细胞在化学条件培养基中定向分化的形态学观察

摘要

目的:观察体外无血清化学培养条件下少突胶质前体细胞向成熟少突胶质细胞的定向分化。方法:实验于2000-04/07在复旦大学上海医学院解剖学教研室完成。①取新生SD大鼠获取少突胶质前体细胞;前O2A祖细胞原代混合培养7d后,以B104神经胶质瘤细胞株条件培养液犤100mL含:牛血清白蛋白每20mg,胰岛素2.5mg,转铁蛋白20mg,腐胺1.6mg,亚硒酸钠0.5μg,黄体酮0.6μg,生物素0.24μg,T33μg,T40.04mg,溶于DMEM/F12对半配置的培养液中犦增殖并纯化的少突胶质前体细胞,然后将培养基更换为无血清的化学条件培养基。②倒置相差显微镜观察记录24,48和72h细胞的形态变化,分化成熟的少突胶质细胞作扫描电镜观察。结果:少突胶质前体细胞无血清化学条件培养基培养形态学演变:培养24h,少突胶质前体细胞突起增加为三极或四极,胞体增大稍迟;48h后突起明显增多,相互之间连接成网;72h,胞体大且边缘不规则,突起分支更加清晰,分支彼此呈三维立体交错,部分突起之间可见指环状或膜片状结构。结论:化学条件培养基可使在体外培养条件下的少突胶质前体细胞定向分化为成熟的少突胶质细胞,细胞形态呈现渐变的过程。