间接免疫荧光法观察内向整流性钾通道Kir2.1在大鼠睫状体的分布

摘要

目的:Kir2.1通道存在角膜的内皮细胞,参与膜静息膜电位的产生和跨膜转运,睫状体对房水的生成过程中K+的转运起到关键性的作用。文章在蛋白水平探讨Kir2.1在大鼠睫状体的分布情况。方法:实验于2005-03/2006-10在中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系完成。①实验材料:清洁级成年Wistar大鼠8只,雌雄不拘,体质量150～180g,眼睛活动正常,外观正常,角膜透明、无损伤。②实验过程及评估:取正常Wistar大鼠眼球冰冻包埋切片,行苏木精-伊红染色,普通光镜下观察大鼠睫状体的组织结构;在睫状体组织切片加入多克隆兔抗kir2.1一抗,再加AlexaFluor羊抗兔IgG555荧光二抗,用常规间接免疫荧光组织化学方法检测2.1在大鼠睫状体的分布情况。结果:①睫状体组织结构从外向内可分为7层,即睫状体上腔、睫状体肌层、基质层、玻璃膜、色素睫状上皮层、无色素睫状上皮层和内界膜层。②Kir2.1免疫活性分布在睫状体无色素上皮细胞近房水侧的基底面的胞膜和胞浆中,睫状体的色素上皮细胞无免疫活性。结论:Kir2.1分布于大鼠睫状体的无色素上皮的基底面的胞膜和胞浆中,可能与房水的生成有重要关系。