组织块培养法扩增人脂肪源性干细胞的生物学特征鉴定

摘要

背景:组织块培养法分离人脂肪源性干细胞并进行体外培养,培养体系简单,节约时间,较好地保持了干细胞的生物学特性,并据此向多方向诱导分化,为组织工程学种子细胞的临床应用提供理论依据和参考路线。目的:观察组织块培养法分离的人脂肪源性干细胞的基本生物学特性、表面抗原特点及其向成骨细胞和脂肪细胞诱导分化潜能。方法:取健康人腹部皮下脂肪组织,组织块培养法分离出脂肪源性干细胞,进行体外培养,观察其形态特征。流式细胞仪检测第 3 代脂肪干细胞的细胞周期及表面抗原。取第 3 代人脂肪干细胞,分别用成骨和成脂诱导培养液诱导其向成骨细胞和脂肪细胞分化,Von Kossa 染色、油红 O 染色定性鉴定。结果与结论:原代及传代的人脂肪干细胞形态均类似成纤维细胞,生长能力旺盛。第 3 代人脂肪干细胞中,超过 88%的细胞都处于 G0/G1期。第 3 代脂肪干细胞表面抗原表达:CD29、CD44、CD90、CD105 表达阳性,CD34、CD45、CD106表达阴性。人脂肪干细胞经成脂诱导后 21 d,油红 O 染色阳性;成骨诱导培养后,茜素红染色和 Von Kossa 染色阳性。因此,实验证实人脂肪源性干细胞能向成骨细胞和脂肪细胞诱导分化。