胶原支架上体外三维培养成年大鼠心肌细胞

摘要

背景：前期研究中已经在Atelocol agen胶原支架培养出了具有收缩功能的乳鼠心肌细胞.目的：在Atelocol agen胶原支架上三维培养成年大鼠心肌细胞. 方法：将成年SD大鼠心肌细胞经消化培养并纯化后,种植到Atelocol agen胶原支架上进行三维培养.应用倒置显微镜动态观察心肌细胞在 Atelocol agen 胶原支架上的生长状况;对三维培养的心肌细胞块进行冰冻切片,分别进行肌钙蛋白免疫组织化学和免疫荧光显色,对支架上生长的细胞进行鉴定. 结果与结论：成年SD大鼠心肌细胞接种12 h开始贴附支架生长,24 h与支架汇合、紧密黏附,但心肌细胞并不产生自律性搏动,细胞之间夹杂少量崩解的细胞碎片;48 h换液后支架网孔中崩解的细胞被换掉,剩下大部分细胞贴附在支架壁边缘生长.苏木精-伊红染色显示培养48 h细胞与支架形成复合体.形态学鉴定证明支架网孔中生长的主要是心肌细胞.免疫组织化学和免疫荧光显色均显示在支架内生长的大部分是心肌细胞,并且紧贴支架,生长良好.