聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯载生长因子的缓释纳米微球

摘要

背景：骨形态发生蛋白2可增加软骨细胞和祖细胞基质的产生，可增强组织金属蛋白酶抑制因子1、sox9基因、Ⅱ型胶原以及聚集蛋白聚糖的表达，具有诱导间充质细胞迁徙、增殖、分化，最终促使软骨、骨形成的作用。目的：制备重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球缓释系统，观察微球生长因子形态和粒径分布、载药量、包封率、体外缓释时间及生物活性。方法：采用复乳-干燥法制备重组人骨形成蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统，体外分离培养猪软骨细胞。实验分为3组：第1组培养液不添加药物做为对照；第2组培养液中添加含20μg/L重组人骨形态发生蛋白2；第3组培养液中添加20μg/L重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球；其中在第2组和第3组又将重组人骨形态发生蛋白2和重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球分别设为55，100μg/L两种的有效浓度，采用MTT法检测微球对软骨细胞增殖的影响，模拟体内条件观察纳米微球的体外缓释性及生物活性。结果与结论：该纳米微球表面光滑圆整，球体大小均匀，粒径为231-415 nm，扫描电镜平均粒径323 nm。微球的包封率和载药量分别为（79.63＆#177;0.16）%和（1.92＆#177;0.16）%。根据15 d内对重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球的体外释药的观察，保持持续释放重组人骨形态发生蛋白2，且释放的浓度呈增长水平。该微球缓释系统有生物活性，能显著促进猪软骨细胞的增殖，其效应高于单纯重组人骨形态发生蛋白2的效应。提示重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球缓释系统包封率、载药量、体外释药性以及生物活性符合纳米微球的一般规律，能够满足相应的软骨缺损修复要求。