体外培养条件下兔脊柱运动节段髓核组织的变化

摘要

背景:椎间盘器官体外培养模型作为体内试验和细胞培养的联系,能够在原生基质中维持细胞活性,从而保留了重要的细胞与细胞及细胞与基质的相互作用.目的:观察体外培养兔脊柱运动节段模型髓核组织的变化.方法:将13只新西兰白兔处死后在无菌条件下取出脊柱运动节段50个,在高渗培养基中进行整体培养(410 mOsm/kg),于培养前及培养后第3,7,14,21天,各取10个椎间盘分别进行苏木精伊红染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学、蛋白多糖含量和髓核细胞活力测定.结果与结论:培养14d苏木精-伊红显示椎间盘组织结构基本保持完整,21 d椎间盘组织形态学破坏;Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强度14d无显著差异(P＞0.05),21 d染色变浅,与之前各时间点相比有显著差异(P＜0.05);蛋白多糖PAS/AB染色7d内强度无降低,14d强度有所减弱,21 d染色强度进一步减弱;髓核细胞荧光检测21 d髓核细胞荧光强度减弱,细胞活性降低,与之前各时间点比较差异明显(P＜0.05).结果表明,培养14 d兔脊柱运动节段椎间盘髓核组织退变不显著,培养21 d模型髓核退变明显,脊柱运动节段目前在14d内可作为研究生物力学对椎间盘影响的体外实验模型.