亚砷酸钠对AML12肝细胞氧化应激、凋亡损伤及Hippo信号通路的影响

摘要

背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的关注焦点。目的:探究亚砷酸钠(NaAsO_(2))对AML12肝细胞氧化应激、凋亡的作用及Hippo信号通路中关键分子表达的影响。方法:AML12肝细胞分别暴露于0,10,15,20,25,30μmol/L亚砷酸钠24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞存活率,荧光探针染色结合流式细胞术检测细胞内活性氧表达水平,化学比色法检测细胞内半胱天冬氨酸蛋白酶3相对活性,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测Yes相关蛋白mRNA表达水平,Western blot检测磷酸化哺乳动物不育系20样激酶1/2、磷酸化Yes相关蛋白、Yes相关蛋白的蛋白表达水平。结果与结论:①与对照组相比,随着亚砷酸钠浓度的增加:AML12肝细胞存活率逐渐降低;AML12肝细胞内活性氧表达水平逐渐升高;AML12肝细胞内半胱天冬氨酸蛋白酶3相对活性及细胞凋亡率逐渐升高;AML12肝细胞Yes相关蛋白mRNA相对表达量无明显变化;AML12肝细胞磷酸化哺乳动物不育系20样激酶1/2和磷酸化Yes相关蛋白的蛋白相对表达量逐渐升高、Yes相关蛋白的蛋白相对表达量逐渐降低;②提示亚砷酸钠所致AML12肝细胞氧化应激和凋亡损伤可能与Hippo信号通路的激活有关。