EPO预处理对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤TNF-α表达的影响及机制

摘要

目的 观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理对培养心肌细胞缺氧复氧前后TNF-α表达的影响,并进一步研究其可能的NF-κB信号机制.方法 采用培养乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,分为对照组、EPO组[缺氧复氧前24h,培养液中加入终浓度10 U/ml的重组人促红素(recombinant human erythropoietin,RHuEPO)]、EPO+吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)组(缺氧复氧前24h,加入终浓度10 U/ml的RHuEPO和5μg/ml的PDTC)和PDTC组(缺氧复氧前24h,加入终浓度5 μg/ml的PDTC).分别于缺氧复氧损伤前后,以RT-PCR和western blot检测各组心肌细胞TNF-α基因表达变化,同时以EMSA检测各组心肌细胞NF-κB活性变化.结果 缺氧复氧损伤前,各组心肌细胞TNF-α基因表达水平差异无统计学意义,均较弱.损伤后各组心肌细胞TNF-α基因表达水平较损伤前对照组显著升高(P＜0.01),而EPO组TNF-α基因表达水平低于其他各组(P＜0.01).缺氧复氧损伤前EPO组NF-κB活性高于其他各组(P＜0.01),损伤后各组NF-κB活性显著高于损伤前对照组(P＜0.01),EPO组NF-κB活性低于其他各组(P＜0.01).结论 EPO预处理抑制缺氧复氧后心肌细胞TNF-α基因表达升高,可能与缺氧复氧后NF-κB活性升高被抑制有关.EPO预处理可能通过NF-κB活化的负反馈机制抑制缺氧复氧后心肌细胞NF-κB活性的升高.