成人骨髓基质干细胞分化来源的肝细胞的冻存与复苏研究

摘要

目的在体外诱导人骨髓基质干细胞向肝细胞分化成熟的基础上,将细胞深冻保存,观察冻存复苏后细胞存活率及功能状况。方法在含有多种细胞因子的条件培养基中体外诱导成人骨髓基质干细胞,当细胞显示成熟肝细胞特征后,将细胞分别冻存于90%胎牛血清（FBS）和10%二甲亚砜（DMSO）（A组）、10%FBS、30%甘油和60%培养基（B组）和10%FBS、10%DMSO和80%威斯康星器官保存液（UW液）（C组）中。冻存4周后复苏细胞,测定各组细胞存活率及白蛋白合成情况。结果成人骨髓基质干细胞分化来源的肝细胞经冻存复苏后可恢复功能细胞形态,A、B和C组冻存液中细胞复苏后细胞存活率分别为（60·0±3·3）%、（91·0±2·6）%和（89·0±1·4）%,培养24h后检测上清液白蛋白浓度分别为（0·210±0·005）g/L、（0·340±0·020）g/L和（0·330±0·030）g/L。结论成人骨髓基质干细胞分化来源的肝细胞冻存复苏后仍保持较高的细胞存活率和功能,可作为临床肝细胞移植及生物人工肝的重要肝细胞来源。