以树突状细胞为基础个体化抗胃癌过继免疫治疗的研究

摘要

目的探讨负载自体肿瘤细胞裂解物的成熟树突状细胞(ATLs-mDCs)体外诱导个体化抗胃癌过继免疫治疗的效应.方法建立短期培养的原代胃癌细胞系.用ATLs-mDCs激活自体T细胞,制备肿瘤特异性细胞毒性T细胞(CTLs).自体树突状细胞(DCs)均分为未成熟DCs、成熟DCs和ATLs-mDCs 3组,分别应用流式细胞仪及混合淋巴细胞增殖反应方法,检测DCs的免疫功能状态;应用细胞毒杀伤试验验证肿瘤特异性CTLs的杀伤活性;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定DCs培养上清中白细胞介素12(IL-12)和CTLs上清中γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平.结果 ATLs-mDCs上调HLA-DR、CD80、CD83和CD86的表达水平,同时获得高效刺激自体T细胞增殖的能力.ATLs-mDCs诱导产生的CTLs对自体胃癌细胞的杀伤率为(84±11)%,显著高于对两株异体胃癌细胞的杀伤率[(19±7)%和(19±11)% (t=54.18和56.46,P值均<0.01)].ATLs-mDCs上清液中IL-12的浓度显著高于单纯成熟DCs (t=15.47,P<0.01)及未成熟DCs (t=28.44,P<0.01).3组DCs分别激活自体T细胞产生的CTLs上清液中INF-γ的浓度ATLs-mDCs组高于单纯成熟DCs组 (t=4.84,P<0.05),并显著高于未成熟DCs组(t=13.74,P<0.01).结论 ATLs-mDCs在体外诱导产生的CTLs能有效特异性杀伤自体胃癌细胞.