pIRES2-EGFP-IGF-1真核表达载体转染骨髓基质细胞的动物实验

摘要

目的构建表达胰岛素样生长因子1（IGF-1）的骨髓基质细胞（MSC）的动物模型,为进一步将其用于修复牙周组织缺损奠定基础。方法将真核表达载体pIRES2-EGFP-IGF-1转染MSC,获得阳性细胞克隆,免疫组化、Westernblot鉴定IGF-1蛋白表达水平,ELISA方法检测转染细胞上清液中IGF-1蛋白含量;用转染细胞上清液培养牙周膜细胞（PDLC）,甲基噻唑基四唑（MTT）法检测对细胞增殖的影响。结果免疫组化和Westernblot结果证实,转染细胞内有IGF-1蛋白的高表达。ELISA方法检测显示,IGF-1能分泌至细胞外,且能明显促进PDLC的增殖。结论IGF-1基因可成功地转染MSC细胞,获得高表达有活性的IGF-1蛋白的MSC细胞模型,为将其应用于牙周组织工程提供了实验依据。