哈茨木霉菌非水溶性葡聚糖酶的理化及生物学性质研究

摘要

目的研究源于哈茨木霉菌的非水溶性葡聚糖酶的理化性质,及其对口腔链球菌黏附和人工生物膜结构的影响。方法比较6种木霉菌产生非水溶性葡聚糖酶的能力,选出酶活性最高的菌株;确定该酶最适pH值和反应温度;RT-PCR扩增酶基因,连T载体,测序。通过黏附试验检测非水溶性葡聚糖酶抑制链球菌黏附的效果,并应用激光共聚焦显微镜观察其对人工生物膜结构的影响。结果哈茨木霉菌Th1产生的非水溶性葡聚糖酶活性最高,其反应最适pH值为5·5,温度40℃;基因序列与GenBank中的已知序列同源性达到92%。非水溶性葡聚糖酶能显著抑制链球菌的黏附;与未加酶组相比,加酶组生物膜高度降低,结构松散。结论哈茨木霉菌Th1产生的非水溶性葡聚糖酶能明显抑制细菌的黏附,影响生物膜的形成。