Trolox削弱一次剧烈运动后泛素蛋白酶体途径对大鼠骨骼肌蛋白质的降解作用

摘要

目的:探讨抗氧化剂Trolox对运动后大鼠骨骼肌泛素蛋白酶体途径降解蛋白质的影响.方法:42只雄性SD大鼠随机分为2组,对照组24只(运动前1小时腹腔注射0.25 mlPBS溶液/100 g体重)和注射组18只(运动前1小时注射同体积Trolox,注射量30 mg Trolox/kg体重).跑台适应3天后,从对照组选取6只作为安静对照,然后进行1次1小时大强度上坡跑,速度25 m/min,坡度5％.运动后即刻和运动后1、6小时分别从每组取6只大鼠的腓肠肌.高效液相色谱法检测3-MH含量,实时荧光定量PCR检测MuRF1、MAFbx基因表达,Western Blot检测细胞质IκBα蛋白含量,EMSA检测细胞核NF-κB结合DNA的能力,比色法检测肌肉MDA含量.结果:(1)对照组大鼠腓肠肌MDA含量在运动后即刻(P＜0.01)、运动后1小时(P＜0.01)、运动后6小时(P＜0.05)显著高于安静时,注射组运动后即刻显著低于对照组(P＜0.05).(2)对照组腓肠肌3-MH含量在运动后即刻、运动后6小时非常显著高于安静时(P＜0.01),注射组运动后即刻(P＜0.01)、运动后6小时(P＜0.05)显著低于对照组.(3)对照组运动后1、6小时腓肠肌MAFbx、MuRF1 mRNA含量非常显著高于安静时和运动后即刻(P＜0.01),注射组运动后1小时显著低于对照组(P＜0.01).此外,注射组运动后6小时MAFbx mRNA含量显著低于对照组(P＜0.05).(4)对照组运动后即刻、运动后1小时IκBα含量较安静时非常显著下降(P＜0.01),注射组运动后即刻(P＜0.05)、运动后1小时(P＜0.01)均显著高于对照组.(5)对照组运动后1小时细胞核NF-κB结合DNA能力非常显著高于安静时(P＜0.01),注射组运动后1小时显著低于对照组(P＜0.05).结论:Trolox能减少运动产生的氧化应激,通过抑制NF-κB活性,减少运动后骨骼肌泛素连接酶基因表达,缓解泛素蛋白酶体途径对骨骼肌蛋白质的降解作用.