基于抗体包被纳米金和铜配合物共固定修饰电极的癌胚抗原安培免疫传感器研究

摘要

研制了基于抗体包被化学镀纳米金(AuNPs)和[Cu(bpy)_2(ONO)]NO_3配合物(CuL)共固定修饰玻碳电极(GCE)的安培免疫传感器,并用于血清中癌胚抗原(CEA)的检测.首先将GCE电极表面氧化形成羧基,进而键合上乙二胺.将此胺化电极浸泡在CuL和化学镀金溶液后,CuL可通过π-π堆积作用吸附到GCE表面,并在电极表面还原成30～50nm 的纳米金层(GCE∣CuL/AuNPs).将上述电极浸泡在CEA抗体(anti CEA)溶液中,利用AuNPs周定anti CEA,并通过辣根过氧化物酶(HRP)封闭剩余的AuNPs位点,由此构建了一类快速检测CEA的无试剂安培免疫传感器(GCE∣CuL-AuNPs/anti CEA-HRP).其中CuL作为电子媒介体对过氧化脲(CP)有催化还原作用,而且HRP可增强这种作用.当该传感器在37 ℃下,含CEA的pH 6.5 PBS溶液中温育30 min后,随着温育液中CEA浓度的增加,电极表面形成的免疫复合物也增加,导致CuL对CP的催化电流下降.电流下降百分比1%与CEA浓度在0.1～80 ng/mL之间成线性关系,检测限为0.052 ng/mL(3σ).由于采用化学镀法可以方便地在GCE表面制备纳米金膜进而包被抗体,并通过π-π堆积作用吸附CuL作为电子媒介体,故该免疫电极制备简单;采用可催化CP还原的HRP封闭AuNPs层多余位点,大大提高了电极灵敏度,有望用血清中痕量CEA分析.