艾拉莫德对白细胞介素-1β诱导的人滑膜成纤维细胞株细胞产生细胞因子的影响

摘要

目的观察艾拉莫德对人滑膜成纤维细胞株（MH7A）产生细胞因子的影响,探究其抗RA的作用机制。方法以终浓度200 ng/ml的IL-1β刺激常规培养的MH7A细胞,给予终浓度分别为高浓度（100μmol/L）、中浓度（25μmol/L）、低浓度（6.25μmol/L）的艾拉莫德干预培养48 h,同时设等浓度的甲氨蝶呤为阳性对照组、予IL-1β刺激的模型组、不予IL-1β刺激的空白对照组相同条件下培养48 h,取细胞培养上清以ELISA检测血管内皮生长因子（VEGF）、内皮抑素和TNF-α。应用SPSS 13.0统计软件进行统计学处理,采用析因设计的两因素方差分析、单因素方差分析和LSD检验。结果空白对照组:VEGF为（57±98）pg/ml、内皮抑素为（924±39）pg/ml、TNF-α为（16.40±6.08）pg/ml,模型组:VEGF为（1 155±177）pg/ml、内皮抑素为（295±35）pg/ml、TNF-α为（36.90±3.54）pg/ml,空白对照组与模型组比较差异均有统计学意义:VEGF（t=9.092,P＜0.01）、内皮抑素（t=19.685,P＜0.01）、TNF-α（t=2.495,P＜0.05）;艾拉莫德实验组的VEGF:高浓度组为（640±127）pg/ml、中浓度组为（787±172）pg/ml、低浓度组为（776±99）pg/ml,甲氨蝶呤对照组的VEGF:高浓度组为（1 322±264）pg/ml、中浓度组为（1 071±63）pg/ml、低浓度组为（863±70）pg/ml,3个浓度艾拉莫德实验组的VEGF分泌明显减少,与模型组比较差异均有统计学意义（高浓度组:t=4.264,P＜0.01;中浓度组:t=3.045,P＜0.01;低浓度组:t=3.132,P＜0.01）,艾拉莫德实验组与甲氨蝶呤对照组比较而言高浓度、中浓度组差异有统计学意义（t=5.653,2.350,P均＜0.05）,而甲氨蝶呤对照组仅低浓度组VEGF的分泌减少明显,与模型组比较差异有统计学意义（t=2.415,P＜0.05）;艾拉莫德实验组的内皮抑素:高浓度组为（979±30）pg/ml、中浓度组为（842±14）pg/ml、低浓度组为（485±72）pg/ml,甲氨蝶呤对照组的内皮抑素:高浓度组为（934±23）pg/ml、中浓度组为（825±28）pg/ml、低浓度组为（772±44）pg/ml,3个浓度的艾拉莫德实验组和甲氨蝶呤对照组内皮抑素的分泌明显增加,与模型组比较差异均有统计学意义（高浓度组:t=21.387,P＜0.01;中浓度组:t=17.122,P＜0.01;低浓度组:t=5.929,P＜0.01）,高、中浓度艾拉莫德实验组内皮抑素的分泌增加比低浓度艾拉莫德实验组更明显,差异有统计学意义（高、低浓度组比较t=15.458,P＜0.01;中、低浓度组比较t=1 1.193,P＜0.01）,低浓度艾拉莫德实验组分泌的内皮抑素比低浓度甲氨蝶呤对照组的少,相比差异有统计学意义（t=9.001,P＜0.01）;艾拉莫德实验组的TNF-α:高浓度组为（4.73±1.15）pg/ml、中浓度组为（4.40±2.65）pg/ml、低浓度组为（4.40±0.10）pg/ml,甲氨蝶呤对照组的TNF-α:高浓度组为（4.43±3.61）pg/ml中浓度组为（13.40±16.46）pg/ml、低浓度组为（21.73±16.50）pg/ml,3个浓度艾拉莫德实验组TNF-α的分泌减少均非常明显,与模型组的相比差异有统计学意义（高浓度组:t=3.914,P＜0.01;中浓度组:t=3.955,P＜0.01;低浓度组:t=3.955,P＜0.01）,高、中浓度甲氨蝶呤对照组的TNF-α减少明显,与模型组比较差异有统计学意义（高浓度组:t=3.955,P＜0.01;中浓度组:t=2.859,P＜0.05）,高、中浓度的艾拉莫德实验组与相应浓度的甲氨蝶呤对照组分泌TNF-α比较差异无统计学意义,而低浓度的艾拉莫德实验组与低浓度的甲氨蝶呤对照组比较而言其TNF-α的分泌减少更明显,差异有统计学意义（t=2.359,P＜0.05）。结论艾拉莫德对MH7A细胞VEGF、内皮抑素、TNF-α的分泌具有较强影响,对RA的治疗具有积极意义,其抗RA作用不仅与减少滑膜细胞释放TNF-α有关,尚可能与减少VEGF释放,增加内皮抑素的释放减轻关节滑膜血管新生有关。