E1A基因通过抑制NF-κB信号通路增加鼻咽癌细胞放射敏感性实验研究

摘要

目的探讨E1A基因对人鼻咽癌细胞放射敏感性的影响及其可能机制。方法通过腺病毒载体介导,将E1A基因转染至鼻咽癌CNE-2R细胞,采用RT-PCR鉴定E1A基因的表达;分别给予未转染组（PBS组）、转染空载体Ad-β-gal组（Ad-β-gal组）和转染E1A组（Ad-E1A组）的CNE-2R细胞0、2、4、6、8Gy照射,应用克隆形成实验检测各组CNE-2R细胞放射敏感性的变化;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;蛋白印迹法检测各组细胞NF-κB、CK2α、Bcl-2及Cleaved caspase-3蛋白的表达。结果 RT-PCR确认E1A基因已整合到CNE-2R细胞中且稳定表达;Ad-E1A组CNE-2R细胞克隆形成率明显少于PBS和Ad-β-gal组的克隆形成率,Ad-E1A组CNE-2R细胞SF2为0.217小于PBS组和Ad-β-gal组的0.602和0.585（P＜0.05）,Ad-E1A组α/β值为24.68大于PBS组和Ad-β-gal组的5.268和5.132（P＜0.05）;流式细胞术显示单独放射可促进CNE-2R细胞的凋亡,当与E1A基因联合使用时,细胞凋亡率明显增加（P＜0.05）;蛋白印迹法显示E1A基因可下调NF-κB/P65、CK2α、Bcl-2和上调Cleaved caspase-3的表达。结论 E1A基因可以通过抑制CK2的表达阻断NF-κB信号通路以及促进细胞凋亡,来提高鼻咽癌细胞对放射的敏感性。