猪链球菌2型05ZYH33菌株启动子的筛选和鉴定

摘要

为了筛选和鉴定用于猪链球菌(S.suis)致病因子和致病机制研究的启动子,本研究通过质谱鉴定了来自S.suis 2型05ZYH33菌株的5个高丰度蛋白质,并通过其驱动GFP蛋白和甘露糖苷酶SSU05_ 1921的表达水平,评估了这5个蛋白相应的基因启动子的强弱.结果 显示,这5种蛋白质分别为SSU05_0177、SSU05_0530、SSU05_1503、SSU05 1815和SSU05 1868,相应的5个启动子P0177、P0530、,P1503、P1815和P1868均能够有效驱动GFP在E.coli和S.suis中的高水平表达,但是P1815、P0177和P1868不能驱动SSU05_ 1921在S.suis中的表达.P0530和P1503能够驱动SSU05_ 1921在S.suis中的表达,并且P1503启动子驱动GFP和SSU05_1921的表达水平均比P0530启动子驱动的高两倍以上.因此,P0530和P1503是S.suis的强启动子,并且P1503更强于P0530.这在高水平表达GFP用于标记菌体,以及构建无启动子基因的回复突变菌株中发挥关键作用,在S.suis遗传操作中具有很好的应用前景.