产气荚膜梭菌α-β融合基因的高效表达

摘要

用PCR从含产气荚膜梭菌α毒素基因的质粒pXETA1中扩增出α毒素基因,用NcoI和BamHI双酶切该α毒素基因,回收0.95kb的α毒素基因片段,再用NcoI和Bam HI双酶切含产气荚膜梭菌β毒素基因质粒pXCPAB2,与上述回收的α毒素基因片段连接,转化至受体菌BL21(DE3)中.经NcoI、BamHI、NcoI酶切反应鉴定和核苷酸序列分析证实,获得了理想重组质粒pXCPAB2,该重组质粒含有α-β融合基因.重组菌株BL21(DE3)(pXCPAB2)经IPTG诱导后,其表达产物经ISA检测和SDS-PAGE分析,结果表明重组菌株可以高效表达α-β融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的22.14%.