猪伪狂犬病病毒及猪细小病毒二联PCR检测方法的建立

摘要

根据猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)2种病原体的基因保守序列,分别设计并合成了与PRV的gp50基因序列和PPV的VP2基因互补的两对引物,进行单相PCR,分别扩增出预期的217bp片段及158 bp片段;同时,用这两对引物对混合的样品中的PRV和PPV的DNA模板进行二联PCR扩增及二联PCR反应条件的优化,结果得到2条与试验设计相符的217 bp(PRV)和158 bp(PPV)特异性条带:敏感性检测结果表明,对PRV的检测可以达到10-6.11/20μL TCID50、对PPV的检测可以达到0.008HA单位的核酸模板.本文建立的PCR方法,可以在24 h内对样品进行快速检测,可作为PRV、PPV感染和临床样品检测的可靠手段.