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马巴贝斯虫Be82基因截短片段的克隆与表达

         

摘要

本实验在人工合成马巴贝斯虫Be82/236-381 A基因的基础上,通过PCR扩增、酶切、串联的连接方法构建了3个Be82/236-381基因截短片段,并连接克隆于pGEX-4T-1中进行了重组蛋白表达.经PCR鉴定,3个重组表达的Be82/236-381基因截短片段的大小分别为192 bp、306 bp和420 bp,与国外发表的基因序列进行比对,其核苷酸的同源性分别为100%、97.3%和96.6%.经SDS-PAGE电泳鉴定,3种融合表达蛋白分子量分另q为33 ku、37 ku和42 ku.经ELISA检测,3种融合表达的蛋白均能与马巴贝斯虫阳性血清发生特异性反应.

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