H5N1禽流感病毒以巨胞饮作用侵入细胞的研究

摘要

流感病毒在体外感染细胞的过程中,是分别通过网格蛋白(Clathrin)和小窝蛋白(Caveolae)介导的两种内吞途径进入细胞内.为探索H5N1亚型禽流感病毒(AIV)侵入细胞的其他机制,本实验在胎牛血清存在的情况下,采用Dynasore抑制剂抑制网格蛋白和小窝蛋白介导的两种AIV侵入体外培养细胞途径,然而AIV仍然可以感染A549人源肺癌细胞系.进一步实验结果显示,采用巨胞饮抑制剂5-(N-乙基-N-异丙基)阿米洛利(EIPA)能够完全抑制病毒的感染,确认巨胞饮作用是AIV侵入体外培养的另外一种途径.同时,AIV也可以通过巨胞饮作用侵入不同来源的DF1禽源细胞和MDCK犬源细胞.此外,分别具有与禽源受体、人源受体和禽源-人源双重受体亲和特性的3株流感病毒仍然能够通过巨胞饮作用感染A549细胞.受体特异性试验表明,去除细胞的唾液酸受体后,病毒则不能够感染体外培养的细胞,表明唾液酸受体在巨胞饮作用的病毒侵入方式中仍然具有关键作用.本实验结果证明,巨胞饮作用是流感病毒侵入细胞的另外一种途径.该结果将有助于进一步研究流感病毒的感染机理.